您好，我想請教一下食品菌落總數(shù)計算方法，和怎么做出廠檢驗報告？ _菌落

1 范圍本標準規(guī)定了食品中菌落總數(shù)（Aerobic plate count）的測定方法。本標準適用于食品中菌落總數(shù)的測定。2 術語和定義2.1 菌落總數(shù) aerobic plate count食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間等）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù) 。3 設備和材料除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設備外，其他設備和材料如下：3.1 恒溫培養(yǎng)箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃ 。3.2 冰箱：2 ℃～5 ℃ 。3.3 恒溫水浴箱：46 ℃±1 ℃ 。3.4 天平：感量為0.1 g 。3.5 均質(zhì)器。3.6 振蕩器。3.7 無菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸頭。3.8 無菌錐形瓶：容量250 mL、500 mL 。3.9 無菌培養(yǎng)皿：直徑90 mm 。3.10 pH 計或pH 比色管或精密pH 試紙。3.11 放大鏡或/和菌落計數(shù)器。4 培養(yǎng)基和試劑4.1 平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基：見附錄A 中A.1 。4.2 磷酸鹽緩沖液：見附錄A 中A.2 。4.3 無菌生理鹽水：見附錄A 中A.3 。5 檢驗程序菌落總數(shù)的檢驗程序見圖1 。圖1 菌落總數(shù)的檢驗程序6 操作步驟6.1 樣品的稀釋6.1.1 固體和半固體樣品：稱取25 g 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000 r/min～10000 r/min 均質(zhì)1 min～2 min，或放入盛有225 mL 稀釋液的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min～2 min，制成1:10 的樣品勻液。6.1.2 液體樣品：以無菌吸管吸取25 mL 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶（瓶內(nèi)預置適當數(shù)量的無菌玻璃珠）中，充分混勻，制成1:10 的樣品勻液。6.1.3 用1 mL 無菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液1 mL，沿管壁緩慢注于盛有9 mL 稀釋液的無菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1 支無菌吸管反復吹打使其混合均勻，制成1:100 的樣品勻液。6.1.4 按6.1.3 操作程序，制備10 倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1 次1 mL 無菌吸管或吸頭。6.1.5 根據(jù)對樣品污染狀況的估計，選擇2 個～3 個適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液），在進行10 倍遞增稀釋時，吸取1 mL 樣品勻液于無菌平皿內(nèi)，每個稀釋度做兩個平皿。同時，分別吸取1 mL 空白稀釋液加入兩個無菌平皿內(nèi)作空白對照。6.1.6 及時將15 mL～20 mL 冷卻至46 ℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于46 ℃±1 ℃恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。6.2 培養(yǎng)6.2.1 待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36 ℃±1 ℃培養(yǎng)48 h±2 h 。水產(chǎn)品30 ℃±1 ℃培養(yǎng)72 h±3 h 。6.2.2 如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長的菌落時，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基（約4 mL），凝固后翻轉(zhuǎn)平板，按6.2.1 條件進行培養(yǎng) 。6.3 菌落計數(shù)可用肉眼觀察，必要時用放大鏡或菌落計數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位（colony-forming units，CFU）表示。6.3.1 選取菌落數(shù)在30 CFU～300 CFU 之間、無蔓延菌落生長的平板計數(shù)菌落總數(shù) 。低于30 CFU 的平板記錄具體菌落數(shù)，大于300 CFU 的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數(shù)應采用兩個平板的平均數(shù) 。6.3.2 其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2，代表一個平板菌落數(shù) 。6.3.3 當平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌
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