
雙脫氧鏈終止法原理是核酸模板在核酸聚合酶、引物、四種單脫氧堿基存在條件下復(fù)制或轉(zhuǎn)錄時(shí),如果在四管反應(yīng)系統(tǒng)中分別按比例引入四種雙脫氧堿基,只要雙脫氧堿基摻入鏈端,該鏈就停止延長(zhǎng),鏈端摻入單脫氧堿基的片段可繼續(xù)延長(zhǎng) 。
接著如此每管反應(yīng)體系中便合成以共同引物為5’端,以雙脫氧堿基為3’端的一系列長(zhǎng)度不等的核酸片段 。
反應(yīng)終止后,分四個(gè)泳道進(jìn)行電泳 。
以分離長(zhǎng)短不一的核酸片段(長(zhǎng)度相鄰者僅差一個(gè)堿基),根據(jù)片段3’端的雙脫氧堿基,便可依次閱讀合成片段的堿基排列順序 。
【雙脫氧鏈終止法原理是什么】
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