咖啡堿亦稱咖啡因（1 ， 3 ， 3一三甲基 一2 ， 6一氧嘌呤 ， 屬黃嘌呤生物堿 ， 分子式 c 。 Hl 。 No2） ， 咖啡堿屬興奮劑 ， 在一定范圍內(nèi) ， 對人體有強(qiáng)心、利尿、解毒等生理作用和保健作用 ， 因此一直是一種緊俏的醫(yī)藥原料 ， 也作為飲料的添加劑 。 茶葉中咖啡堿的質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為 2％ 一5％ ， 是醫(yī)用咖啡堿的重要來源 。 我國茶資源十分豐富 ， 從茶中提取咖啡堿技術(shù)的研究也一直倍受重視 。
咖啡堿的提取方法主要有溶劑法、升華法、吸附法和超臨界二氧化碳提取法（簡稱 SFE法）四類 。 目前 ， 溶劑法存在產(chǎn)品純度低、安全性差（常用有毒試劑作萃取劑） ， 工藝復(fù)雜等缺點(diǎn)；升華法存在升華的咖啡堿定向定位富集困難 ， 收集時損耗較大等缺點(diǎn)；吸附法存在洗脫劑用量多或有毒洗脫劑的使用；SFE法生產(chǎn)成本較高 ， 尚處在實(shí)驗(yàn)室研究階段 。
近年來 ， 微波因促進(jìn)反應(yīng)的高效性和強(qiáng)選擇性 ， 操作簡便 ， 副產(chǎn)物少 ， 產(chǎn)率高及產(chǎn)物易提純等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用 。 本實(shí)驗(yàn)為了避免使用有毒試劑、提高提取率 ， 以水作為溶劑 ， 采用微波輔助萃取法 ， 以咖啡堿得率為考察指標(biāo) ， 采用正交實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)化紅 茶中咖啡堿的微波輔助浸提工藝 。
1 材料與儀器
1 .1 材料
市售紅茶 ， 咖啡堿標(biāo)準(zhǔn)品 ， 其他試劑均為分析純 。
1 .2 儀器
島津 U V一7 2 0型紫外分光光度計(jì) ， 格蘭仕 WD 900E S L 2 3 -3微波爐 ， H H-S 2數(shù)顯恒溫水浴 鍋 ， A CCULAB ALC一210.4型電子天平 ， 2XZ一0 .5型旋片式真空泵 。
2 方法
2 .1 咖啡堿測定方法
按國標(biāo)G B 8 3 1 2 -8 7的方法測定 。
測定紅茶中咖啡堿含量 準(zhǔn)確吸取試液20mL 移入250mL容量瓶中 ， 加入l0m L0 .01 mol/L鹽酸和2m L0 .5 g ／m L堿性乙酸鉛 ， 用水準(zhǔn)確稀至刻度 ， 混勻 ， 離心取上清液 ， 準(zhǔn)確吸取上清5 0 m L注入100 m L容量瓶中 ， 加入 0 .2 m L 9 mol/L硫酸溶液 ， 加水準(zhǔn)確稀釋至刻度 ， 混勻 ， 離心取上液 ， 用10mnl 比色杯在波長274nm 處 ， 以試劑空作參比 ， 測定吸光度 。 咖啡堿的含量按下面公式算：

其中： c為根據(jù)試樣測得的吸光度（ A） ， 從咖啡堿標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的咖啡堿相應(yīng)質(zhì)量濃度 ， m g／m L ； L 1為試液總量 ， m L ； M為試樣的質(zhì)量 ， g ；為試樣中干物質(zhì)的百分含量 ， ％； L ： 為測定時的用液量 ， mL 。
咖啡堿標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 準(zhǔn)確稱取質(zhì)量分?jǐn)?shù)不低于99％的咖啡堿100m g ， 溶于 100 m L水中作為母液 ， 準(zhǔn)確吸取母液各 5 mL加水至100 m L作為工作液 。 分別吸取 0 、5 、l 0 、 l 5 、2 0 、2 5 、3 0 m L 咖啡堿工作液于 一組100 m L容量瓶中 ， 各加入 4 .0 m L鹽酸溶液 ， 用水稀釋至刻度 ， 混勻 .用 1 0mm石英比色杯在紫外分光光度儀上選擇波長2 7 4 mm處 ， 以試劑空白 溶液作參比 ， 測定吸光度（ A） ， 以吸光度為軸 ， 咖啡堿含量為 Y軸繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線 ， 得回歸直線方程為： Y=0 .0 2 09 x ， y=0 . 9 9 9 1 2 .



圖 l 咖啡堿標(biāo)準(zhǔn) 曲線
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 浸提工藝
茶葉一粉碎一 微波處理一恒溫水浴一過濾、分離一測定
2.2.2 單因素實(shí)驗(yàn)
準(zhǔn)確稱量茶葉 5g（精確到 0.0001g） ， 選定其余條件 ， 分別考察粉碎度、料液質(zhì)量比、浸提溫度、浸提時間、提取液 pH值、微波功率、微波作用時1甸等各因素的影響之變化 。
2.2.3 結(jié)果與分析
2.2.3.1 茶葉的粉碎度對浸出率的影響
粉碎度對咖啡堿的浸出率影響較小 ， 未粉碎的茶葉的浸取率最大 ， 粉碎后的茶葉的浸取率反而降低 ， 可能是在粉碎過程中咖啡堿有所損失 。 因此 ， 本實(shí)驗(yàn)選用未粉碎的茶葉進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 。

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