在優(yōu)化茶樹(shù)葉綠素酶提取及活性分析條件的基礎(chǔ)上,對(duì)茶樹(shù)葉綠素酶的分離純化及其性質(zhì)進(jìn)行了研究,結(jié)果表明:加入與鮮葉等量PVP,用pH7.5的磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液提取的葉綠素酶活性最高,葉綠素酶的活性分析最佳條件為在45℃條件下反應(yīng)15min;經(jīng)過(guò)分離純化后,葉綠素酶的純度提高了55.96倍,酶的得率為9.45%,SDS-PAGE結(jié)果顯示有一條蛋白質(zhì)的條帶,酶的亞基分子量為37.2kD;對(duì)純化后的葉綠素酶的性質(zhì)研究表明,該酶最適pH為7.5,45℃時(shí)候反應(yīng)活性最高,在4℃保存條件下,隨著存放時(shí)間的延長(zhǎng),酶活性逐漸下降,保存一個(gè)月后葉綠素酶活性剩余45%,用2mmol/L和7mmol/L的金屬離子(Ca2+、Mg2+、Zn2+、Fe3+)、EDTA處理,都對(duì)葉綠素酶活性有不同程度的促進(jìn)作用 。 【茶樹(shù)葉綠素酶提取、分離純化與性質(zhì)的初步研究】完成機(jī)構(gòu):華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院茶學(xué)專(zhuān)業(yè),湖北武漢430070
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